產品介紹

CFDA SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒是基于CFDA SE對細胞進行增殖及示蹤檢測的試劑盒，本試劑盒由CFDA SE粉末、溶劑及染色緩沖液組成。

CFDA SE是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具有細胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當CFDA SE穿透細胞膜進入活細胞后，可被胞漿內的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強烈的綠色熒光，不能穿透細胞膜，能完好的保留在胞內。CFSE還可自發(fā)并不可逆地與細胞內的氨基共價結合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質上。同時，過量且未被偶聯(lián)的CFDA SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內，被后續(xù)清洗步驟所清除。經CFDA SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)月，因此非常適用于細胞群落分析。

CFDA SE標記細胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也很均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀（FL1通道）根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次（1/2的熒光強度），二次（1/4的熒光強度），三次（1/8的熒光強度），以及更多分裂次數(shù)的細胞。CFDA SE可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經CFDA SE標記的細胞可用于體外和體內增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA SE最常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，NK細胞等其他細胞的增殖檢測。

CFDA SE標記細胞呈綠色熒光，除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。

注意事項

1. 使用前請將產品瞬時離心至管底，再進行后續(xù)實驗。

2. CFDA, SE 易被水解，在水溶液中會很快變質，請在使用過程中避免接觸水。在標記細胞的過程中和水接觸是在許可的范圍內的。

3. CFDA SE溶劑在4ºC、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內，可以20-25ºC水浴溫育片刻至全部融解后方可使用。

4. 本試劑盒對CFDA SE染色體系做了優(yōu)化處理，但建議使用者根據(jù)自身的細胞類型，培養(yǎng)條件以及應用方向來梯度摸索最佳的工作濃度及染色時間。不同的細胞其細胞內酯酶活性不同，因此染色效果具有差異性。

5. 熒光染料均存在淬滅問題，操作過程中請注意避光，以減緩熒光淬滅。

6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。